Diagnosticul infecțiilor cu virusuri herpetice sau Chlamidii

A. Recoltarea

Pe cât posibil, probele recoltate trebuie trimise la laborator în aceeași zi, înainte de sfârșitul programului de lucru al acestuia. Trebuie evitată depozitarea peste noapte a probelor de urină sau țesuturi. Toate probele trebuie plasate în pungă cu gheață. Nu se dezinfectează cu alcool aria de unde urmează a se recolta.

B. Medii de transport

Colectarea probelor pe medii de transport adecvate este esențială pentru asigurarea viabilității microorganismelor ce urmează a fi cultivate.

Sisteme de transport

Exsudate: Virocult,  Chlamydia  Transwab,

Țesuturi: Bulion de cultură furnizat de laboratorul de virusologie

Colectarea de probe pentru laboratorul de virusologie

Toate probele se trimit în gheață.

C. Proceduri disponibile:

Izolare și identificare pentru Herpes Simplex, Cytomegalovirus, Varicella-Zoster, Virus Sincițial Respirator,  Chlamydia  Trachomatis; detectarea de antigen Rotavirus; status imun pentru Varicela-Zoster; status imun pentru Rubeola.

Nu se curăță cu alcool zona din care se vor preleva culturi.

D. Virusuri

  1. Virusuri herpetice (CMV, HSV, VZV)
  2. Fluid din vezicule: Recoltarea cu un tampon steril virocult a fluidului obținut din veziculele sparte sau leziuni
  3. LCR: Recoltarea aseptică în recipiente sterile
  4. Țesut de la biopsie sau autopsie: Imersia țesutului în mediul de transport
  5. Leziuni ulcerative: Exsudate (anal, genital sau ocular). Se folosesc tampoane pentru exsudat tip virocult și se raclează suprafața leziunii.
  6. Urina: Recoltarea din urina de dimineață, proaspăt emisă, este de preferat. Se colectează urina din jetul mijlociu sau prin puncție suprapubiană, în recipient steril. Pentru CMV se vor face minim 2-3 recoltări, pentru creșterea șanselor de descoperire a CMV.
  7. Sânge:
  1. Serologie pentru rubeolă și varicelă: Cel puțin 2 mL sânge integral coagulat; nu este necesar să fie plasat în gheață.
  2. Culturi din sediment leucocitar: Cel puțin 1 mL recoltat în recipient heparinizat.
  1. Virus sincițial respirator: lavaj nazofaringian, aspirat traheal, sputa; exsudat faringian ca ultima alegere.
  2. Virusul imunodeficienței umane (HIV):
  1. Sânge: serologie HIV – cel puțin 2 mL sânge integral, coagulat
  2. Culturi - Se ia legătura cu laboratorul de specialitate pentru instrucțiuni asupra metodelor de cultivare a HIV din sânge. Se obține consimțământul înainte de trimiterea probelor la laborator.

E. Chlamydia trachomatis

Pentru rezultate optime se recoltează aseptic, prin raclaj sau tamponament viguros pentru a asigura un număr adecvat de celule epiteliale în mediul de recoltare.

  1. Tampon de exsudat: Tampon steril pentru transport,  Chlamydia  Transwab conjunctivă: Atingeți ferm cu tamponul de exsudat pleoapa inferioară întoarsă; se plasează în mediu de cultură și se transportă în gheață.
  2. Lavajul nazo-faringian: (Transwab - acceptabil)
  1. Se aspiră aproximativ 1-3 mL de ser-fosfat într-o pară de cauciuc (sau ser fiziologic fără conservant).
  2. Se injectează cu grijă fluidul în nări
  3. Se aspiră fluidul din nări în para de cauciuc. Se transferă conținutul în eprubeta sterilă.
  1. Urina: Nu este potrivită pentru culturi de Chlamydia.

   F. Detectarea antigenelor de rotavirus

Proba de materii fecale în mediu lichid. Nu se acceptă tampon de exsudat.

 G.Transportul probelor

Transportul probelor: În pungă cu gheață, către laboratorul de virusologie, în timpul programului de lucru.

Depozitarea probelor după programul de lucru: labilitatea organismului viral în afara celulelor vii necesită că toate probele să fie transportate la laborator cât mai rapid posibil, în gheață. Dacă se recoltează după orele de lucru ale laboratorului, probele trebuie păstrate la frigider, la 40 C, nu mai mult de 48 de ore. Altminteri, proba trebuie păstrată congelată, la – 700 C. Excepție fac probele de urină și țesuturi care nu ar trebui congelate, ci, în mod ideal, ar trebui cultivate chiar în ziua recoltării.

Micro-organism

Leziuni

Proba recoltată

Mod de transport

HSV - I, II

Buze + cavitate bucală:

gingivostomatită

herpes recurent labial

Lichid din vezicule sau exsudat ;

exsudat faringian

Virocult

Ochi:

Conjunctivită foliculară acută

Ulcerații corneene

Cheratită

Lichid din vezicule sau exsudat;

Virocult

SNC:

encefalită

Biopsie cerebrală*; LCR; HSV PCR

Exsudat faringian

Mediu de transport pentru țesuturi;

Virocult

Meningită aseptică

Testul QBT

Recipient heparinizat

Tegumente:

vezicule

Lichid vezical* sau exsudat

 

Infecții generalizate:

Nou-născut

urină*; QBT*; biopsie; lichid vezical*; spută*; lavaj bronșic; coprocultură*; secreție conjunctivală

Recipient heparinizat

Virocult

VZV

Varicelă

Lichid vezicular

Virocult

Zoster

Lichid vezicular sau LCR

Virocult

Infecții generalizate:

Nou-născut (gravidă cu varicelă)

ser

Recipient neheparinizat

Exsudat faringian, secreție sau lichid  vezicular*, LCR*, urină, lavaj bronșic

Virocult

CMV

Infecții generalizate:

 

 

Nou-născut

Urină*, QBC (buffy coat);

Recipient heparinizat

Saliva, LCR

Virocult

Infecții SNC:

LCR, urină*

 

Altele:

hepatită, pneumonie, mononucleoza

Urină*, buffy coat;

Recipient heparinizat

Biopsie

Recipient de transport pentru țesuturi

Chlamydia Trachomatis

Ochi:

conjunctivită la nou-născut și adult

Exsudat*

Mediu de transport pentru  Chlamydia  

Respirator:

pneumonie la nou-născut

 Exsudat nazal*;

Mediu de transport pentru  Chlamydia

Pneumonie la adult

Exsudat nazofaringian

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Tabel 22 – Diagnosticul infecțiilor

 

*Probele de laborator recomandate pentru o creștere optimă în culturi.